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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:SK-OV-3+LUC人卵巢癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 H9 (人T淋巴細(xì)胞系) 兔主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 人類免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp36抗體 小鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞 K7M2 wt [K7M2-WT] (小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞) 兔肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞 磷酸化組蛋白H4抗體

產(chǎn)品型號(hào):

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問(wèn)量:1290

更新時(shí)間:2025-04-09

產(chǎn)品特性Product characteristics

豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

商品屬性:

組織來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

內(nèi)皮細(xì)胞樣

YS-01X8555

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

豬腦微血管內(nèi)皮分離自腦組織;腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是血腦屏障的主要組成成分,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,能夠限制可溶性物質(zhì)和細(xì)胞等從血液進(jìn)入大腦,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與外周內(nèi)皮細(xì)胞相比具有一些相同特性。它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在腦血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。與外周內(nèi)皮細(xì)胞相同,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)細(xì)胞粘附分子,調(diào)控白細(xì)胞進(jìn)入大腦。由于微血管內(nèi)皮細(xì)胞的器官特異性,內(nèi)皮細(xì)胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織。其主要特征如下:①腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞存在許多細(xì)胞間緊密連接,產(chǎn)生很高的跨內(nèi)皮阻抗,延遲細(xì)胞旁的通量;②腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞缺乏內(nèi)皮細(xì)胞的窗孔結(jié)構(gòu),其液相物質(zhì)胞飲水平較低;③腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞具有不對(duì)稱定位酶和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng),從而產(chǎn)生“兩極分化"的表現(xiàn)型。

方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的豬腦微血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的豬腦微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

包被條件:PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBSEGFbFGFIGFVEGFHeparinHydrocortisonePenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性:可傳2-3

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO25%

豬腦微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

  ② 消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

豬免疫球蛋白E(IgE)試劑盒   組裝/原裝

豬免疫球蛋白A(IgA)試劑盒   組裝/原裝

豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)試劑盒   組裝/原裝

0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)試劑盒   組裝/原裝

FITC標(biāo)記人CD11c單克隆抗體

酸性線粒體肌酸激酶抗體

CLEC4F重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein

Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥(niǎo)苷三0酸酶-發(fā)動(dòng)蛋白2抗體

BLNK重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ASGR1 Protein Human 重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TIMP1 Protein Mouse 重組小鼠 TIMP1僀?僀

Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 0.5mgDynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥(niǎo)苷三0酸酶-發(fā)動(dòng)蛋白2抗體

ASGR1 Protein Human 重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CLEC4F重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白 Protein

TIMP1 Protein Mouse 重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白

BLNK重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

豬內(nèi)皮型合酶(eNOS)試劑盒

Human thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 人甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)試劑盒

GuineapigTumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒分裝

CLIAKitforAmylin(MouseAmylin)ELISAKit小鼠胰淀素

血液S轉(zhuǎn)移酶(GSHST)總活酶動(dòng)力性比色法定量試劑盒20

PorcineB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKitB細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒

豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠活化素A受體抗體IgM(ACV-RAb IgM)試劑盒 ,英文名: ACV-RAb IgM ELISA Kit

Rabbit pyridinium crosslinks (PY) ELISA Kit 兔交聯(lián)物(PY)試劑盒

桿菌(BA)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽

體液元素?zé)晒舛吭噭┖?span>20

ELISAKitPNP人Ⅲ型前膠原肽

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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